近日，扬州大学兽医学院周昕教授联合美国及澳洲相关团队，构建了一种超灵敏的噬菌体探针，可以快速检测禽流感病毒H9N2。成果以《Rapid and reliable ultrasensitive detection of pathogenic H9N2 viruses through virus-binding phage nanofibers decorated with gold nanoparticles》为题，5月14日发表于传感与检测领域顶刊《Biosensors and Bioelectronics》。论文链接https://doi.org/10.1016/j.bios.2023.115423。

长期以来，禽流感病毒对动物及人类健康构成持续威胁。目前H9N2的金标准检测方法是荧光定量PCR。然而，荧光定量PCR依赖于精密仪器，且需要在洁净的空间操作，不能用于现场检测病原。

表面等离子共振（SPR）技术具有检测快速、使用方便的优点，但灵敏度有限。周昕教授团队构建了一种噬菌体修饰金纳米的SPR探针，结合市场上手提式微型SPR仪，用于现场快速检测禽流感病毒H9N2。

研究团队对M13噬菌体进行了基因工程及纳米组装，制备了一种M13噬菌体展示H9N2病毒亲和多肽且周身修饰了百粒AuNPs的噬菌体@金纳米探针。由于金纳米颗粒具有强SPR效应，噬菌体@金纳米探针可实现超强SPR信号。同时，噬菌体展示亲和病毒的多肽具有靶向性，因而金纳米颗粒修饰的M13噬菌体探针可实现超灵敏性检测目标病毒。此外，由于M13噬菌体在宿主细菌中可形成单克隆的肉眼可见蓝斑。因此，SPR芯片结合病毒后可直接涂布上含宿主菌的培养基，生成噬菌体蓝色克隆。克隆数与目标病毒的数量正成比，因此可根据蓝斑数量来判断SPR检测得到的病毒浓度是否有偏差。此种基于噬菌体SPR探针的双验证（即利用噬菌体蓝斑来检查SPR信号结果）传感平台，比传统的SPR技术信号增强40倍，其检测限达到6copies/ mL，灵敏度高于目前的金标准方法荧光定量PCR技术50倍以上。由于该平台的便捷性、灵敏度和耗时短（10min），因此有望未来应用于临床医学检测，为控制禽流感疫情提供帮助。

我校兽医学院博士研究生侯金秀及硕士研究生钱雪佳为论文共同第一作者，香港中文大学毛传斌教授、南澳大学Chih-Tsung Yang博士和我校兽医学院周昕教授为共同通讯作者。该研究得到国家自然科学基金等项目资助。